肝癌细胞HepG2中lncRNA BDNF AS对BDNF基因表达调控作用的研究
该文旨在探讨肝癌细胞HepG2中lncRNA BDNF AS(antisense brain derived neurotrophic factor)对BDNF基因表达的调控作用.将BDNF AS质粒、BDNF AS与 BDNF基因完全互补序列缺失突变质粒瞬时转染肝癌细胞HepG2后采用qPCR方法检测肝癌细胞中lncRNA BDNF AS和BDNF mRNA水平;采用Western blot方法检测BDNF蛋白质水平;采用ELISA方法检测细胞培养上清中BDNF蛋白质水平;采用免疫荧光染色检测BDNF蛋白质水平;采用FISH方法检测lncRNA BDNF AS和BDNF mRNA的水平和亚细胞定位.研究结果显示,转染BDNF AS质粒的细胞中,lncRNA BDNFAS水平高于对照组(P＜0.00l),BDNF mRNA和蛋白质水平均低于对照组(P＜0.001).转染突变体质粒的细胞中,lncRNABDNFAS水平高于对照组(P＜0.05),低于BDNFAS组(P＜0.001),BDNF mRNA和蛋白质水平低于对照组(P＜0.05,P＜0.001),高于BDNFAS组(P＜0.05,P＜0.001).免疫荧光染色发现,转染BDNFA,踬粒和转染突变质粒细胞的平均D值均低于同一视野中未转染的其他细胞(P＜0.05,P＜0.01).FISH染色显示,转染BDNFA踬粒的细胞中,BDNF mRNA在细胞中分布的核/质比低于对照组(P＜0.001);转染突变质粒的细胞中,BDNF mRNA在细胞中分布的核/质比低于对照组(P＜0.05),高于lncRNA BDNFAS过表达的细胞(P＜0.05).该研究结果表明,肝癌细胞HepG2中lncRNA BDNFAS过表达下调BDNF mRNA和蛋白质水平,二者基因完全互补序列参与lncRNA BDNF AS对BDNF基因表达的调控作用.
lncRNA BDNFAS、BDNF、肝癌细胞、基因表达调控
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R96;R28
辽宁省自然科学基金批准号:2015020739资助的课题 This work was supported by Natural Science Foundation of Liaoning Province Grant 2015020739
2017-11-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共9页
1279-1287
