Egr-1对APP基因表达的调控作用

摘要：

该研究构建了含有APP启动子的荧光素酶报告质粒以及缺失突变的报告质粒,将该质粒与Egr-1真核表达载体pCDNA3-Egr-1共转染到HEK293与U87MG细胞中进行荧光素酶活性测定,以确定Egr-1对APP基因表达的调控作用.通过染色质免疫共沉淀实验(chromatin immunoprecipitation assay,CHIP)和凝胶电泳迁移实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)确定Egr-1蛋白在APP启动子上的结合部位,同时利用组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA(trichostatin A)和butyrate诱导内源性Egr-1的表达以及Egr-1抑制剂suramin来作用于细胞,通过蛋白免疫印迹分析(Western blot)检测Egr-1对APP蛋白表达的作用.结果显示,Egr-1蛋白在APP基因启动子上5'UTR区域有特异性的结合部位,去除该结合部位则Egv1失去对APP基因启动子的调控作用,ChIP和EMSA的结果也证实了该结合位点;通过HDAC抑制剂和suramin干扰内源性Egr-1的表达则显著影响了Egr-1对APP基因表达的调控作用.

关键词：Egr-1、淀粉样前体蛋白、阿尔茨海默病、基因表达调控

所属期刊栏目：37

分类号：R737.31;Q78;R3

在线出版日期：2015-02-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：39-46