运用改良的CRISPR/Cas9系统建立HtrA2敲除细胞株

摘要：

能识别特定基因组DNA序列的核酸酶是基因编辑的重要工具.在单链RNA引导下,来源于一种产脓链球菌的成簇规律间隔短回文重复(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)关联蛋白(CRISPR-associated protein 9,Cas9)能够发挥其核酸酶功能对基因组特定序列进行剪切.这种功能依赖于单链引导RNA(single-guide RNAs,sgRNAs或gRNAs)中20 nt的核心靶向序列.在该研究中,作者对已有的CRISPR/Cas9系统载体进行了优化,简化了gRNA表达载体的构建.运用优化后的CRISPR/Cas9系统,我们敲除了HEK293T细胞中HtrA2基因的第一个外显子.这一改进大幅度降低了CRISPR/Cas9技术的使用成本.

关键词：CRISPR/Cas9、HtrA2、基因敲除

所属期刊栏目：36

资助基金：国家自然科学基金批准号:31171333资助的课题 This work was supported by the National Natural Science Foundation of China Grant No.31171333

在线出版日期：2015-01-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1644-1648