p85a基因对小鼠大脑皮层投射神经元迁移的影响
Pi3k/Akt信号通路是近年来发现的参与细胞增殖、调控的重要通路,Pi3k激活可介导多种细胞功能,Pi3k由p85a和p110构成.该研究通过干扰p85a基因的表达,探讨其在小鼠大脑皮层投射神经元迁移中的作用.首先,构建p85a基因的对照质粒(scramble)、siRNA质粒(sip85a-1、sip85a-2)和过表达质粒(OEp85a);接着转染N2a细胞,48h后,用定量PCR方法检测p85a基因mRNA的表达情况.随后,将sip85a-1、sip85a-2、OEp85a质粒分别转入小鼠大脑,4 d后,借助免疫荧光方法检测皮层神经元的迁移情况.定量PCR结果显示:与对照相比,转染sip85a-1、sip85a-2均能显著降低N2a细胞中p85a基因的mRNA表达,抑制效率约为40%(P<0.05);而转染OEp85a质粒后,能显著增加p85a基因mRNA的表达,约为对照组的12倍 (P<0.01).胚胎电转结果中,各区EGFP阳性神经元数目定量分析显示,sip85a-1、sip85a-2、OEp85a质粒均能显著抑制神经元的迁移(P<0.05).大脑发育阶段中,p85a基因在适当范围内,对平衡神经元迁移过程中起着重要作用.
皮层投射神经元、迁移、Pi3k、p85a、定量PCR
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温州市科技计划批准号:Y20130254和浙江省自然科学基金批准号:LQ14C090005资助项目;This work was supported by the Wenzhou Science and Technology plans Grant No.Y20130254 and Natural Science Foundation of Zhejiang Province Grant No.LQ14C090005
2014-09-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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