转MSTN干扰载体细胞株的获得及外源基因整合情况的研究
转基因细胞株的建立能够为转基因体细胞克隆技术奠定重要基础.该实验利用MSTN干扰载体,转染鲁西黄牛胎儿成纤维细胞,获得5个相应的转基因单克隆细胞株.采用Real-time PCR和高效热不对称互交式PCR(hiTAIL-PCR)技术检测细胞克隆中MSTN表达载体的拷贝数及其在牛基因组中的整合位点.结果表明,荧光定量PCR有效检测到5个细胞克隆中质粒的拷贝数分别为2.26士0.32、1.52±0.25、25.68±1.02、8.43士0.73和6.72±0.10.hiTAIL-PCR对整合位点的检测结果表明,质粒片段在插入到基因组的过程中进行了重组,其与基因组的结点处有2或4个共同的碱基序列.该研究探索MSTN扰载体在牛胎儿成纤维细胞中的整合机制,以期获得遗传背景清楚的转基因细胞作为体细胞核移植的重要材料,为高产转基因肉牛新品种的培育提供重要的理论和实验基础.
MSTN、转基因细胞株、拷贝数、整合位点、Real-time PCR、hiTAIL-PCR
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国家转基因专项“高产优质转基因肉牛新品种培育”批准号:2011ZX08007-002资助的课题;This work was supported by the Breeding Program for High-quality New Varieties of Genetically Modified Bovine from the National Major Transgenic Project Grant No.2011ZX08007-002
2014-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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