miR-125b慢病毒表达载体的构建及其对卵巢癌SKOV3细胞增殖和迁移的影响

摘要：

构建并鉴定miR-125b慢病毒过表达载体,研究miR-125b对卵巢癌细胞增殖和迁移的影响及其可能机制.将PCR扩增的miR-125b前体序列与经过酶切后的GP-Supersilencing Vector行连接,产生miR-125b重组慢病毒表达载体.将重组慢病毒载体质粒、pGag/Pol、pRev和pVSV-G共转染293T细胞,包装产生慢病毒.使用收获的病毒颗粒感染卵巢癌SKOV3细胞,嘌呤霉素筛选稳定感染细胞株;实时荧光定量PCR(Real-time qPCR检测miR-125b在SKVO3细胞中的表达;Westem blot检测其潜在靶基因HER-2的表达;MTT实验和Tramwell侵袭实验分别观察miR-125b过表达后SKOV3细胞增殖和迁移能力的改变.该研究成功构建miR-125b慢病毒过表达载体,感染卵巢癌SKOV3细胞后,能够过表达miR-125b,并抑制SKOV3细胞的增殖及迁移,降低潜在靶基因HER-2的表达.该研究证明,miR-125b能够抑制SKOV3细胞的增殖及迁移,并可能通过降低潜在靶基因HER-2的表达而实现.

关键词：miR-125b、HER-2、卵巢癌、细胞增殖、细胞迁移

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资助基金：重庆市渝中区科技计划项目20120205资助的课题;the Project of Science and Technology Plan of Chongqing Yuzhong District

在线出版日期：2014-05-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：483-488