胰腺癌曲古霉素A耐药细胞株转移相关基因表达的研究
该实验旨在探讨曲古霉素A(trichostatin A,TSA)对胰腺癌PANC-1细胞株侵袭转移力的影响.分别通过短时间低浓度TSA(0.1～0.2 μmol/L)处理胰腺癌细胞株PANC-1 24 h,以及长期低浓度递增法建立TSA耐药株(PANC-1-TSA).采用CCK8(cell counting kit-8)测得PANC-l、PANC-1-TSA的IC50分别为(0.51±0.09) tmol/L、(78±5) tmol/L,耐药株耐药指数为153. Transwell侵袭小室实验显示,0.1 μmol/L TSA处理后,胰腺癌PANC-1细胞侵袭力未见明显改变,而耐药株PANC-1-TSA侵袭力较亲本株明显增强.实时荧光定量PCR(RT-qPCR)结果显示,耐药株PANC-1-TSA转移相关基因MMP1/2/7/9/14/15及TIMP1/2 mRNA的表达均明显上升,尤以MMPs mRNA明显.在倒置显微镜观察到耐药细胞形态上发生上皮型向间叶型转化(epithelial mesenchymal transition,EMT),进一步通过RT-qPCR及蛋白免疫印迹(Westem blot)实验证实耐药株发生EMT,其中上皮型标志物表达下降及间叶型标志物表达上升.该实验显示,耐药细胞株PANC-1-TSA侵袭力增强,侵袭、转移相关基因表达明显增加.耐药株形成的过程中,发生上皮-间叶转化(EMT),EMT可能参与了胰腺癌PANC-1-TSA细胞株侵袭能力的增强.
胰腺癌、古曲霉素A耐药、上皮-间叶转化
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浙江省教育厅重中之重学科——外科学和温州市科技局项目Y20090028资助的课题;the Priority Subjects of Zhejiang Education Department-Surgery and Wenzhou Science & Technology BureauGrant Y20090028
2013-12-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
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