DNMT3a表达上调与A549细胞对顺铂耐受关系的实验探究
基因甲基化状态改变是肿瘤获得性耐药产生的重要途径之一.DNMTs是基因甲基化的重要调节因子.为了寻找预测肺腺癌A549细胞对顺铂敏感性的生物标志,该研究以A549细胞和对顺铂耐受的同源A549细胞(A549-DDP)为研究对象,利用质粒转染技术上调A549细胞DNMT3a表达,通过RT-PCR检测转染前后DNMT3a在mRNA水平的表达情况.在不同浓度顺铂作用下,通过MTT法、克隆形成实验检测转染前后细胞增殖率并计算IC50和计数细胞克隆形成数.在相同顺铂浓度作用下,流式细胞仪检测转染前后细胞凋亡分数的改变.结果显示:顺铂作用24 h后,转染DNMT3a表达质粒的A549细胞对顺铂IC50明显高于A549细胞[(9.19±0.91)μmol/L vs (4.96±0.58)μmol/L,P=0.000],转染后的细胞凋亡率明显低于未转染细胞[(1.33±0.38)％ vs (5.22±0.67)％,P=0.039];不同浓度顺铂连续作用5d后,转染DNMT3a表达质粒的A549细胞形成的克隆数均明显高于A549细胞组.结果提示,DNMT3a表达上调是肺腺癌A549细胞对顺铂获得性耐受的重要原因之一.检测肺癌患者血清DNMT3a水平作为预测肺癌患者对顺铂敏感性的生物标志值得进一步研究.
DNMT3a、非小细胞肺癌、A549细胞株、顺铂、化疗耐受
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重庆市自然科学基金cstc2012jjA10105;重庆市卫生局医学科研计划项目2012-2-016;国家临床重点专科建设项目经费[财社2010305号]资助的课题;the Natural Science Foundation of CQ CSTCGrant cstc2012jjA 10105;the Medical Scientific Program of Chongqing Municipal Health BureauGrant 2012-2-016;the National Clinical Key Subject Construction ProjectGrant 2010305
2013-09-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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