几丁质酶结构域内含蛋白1(Chid1)基因剔除小鼠的建立

摘要：

建立几丁质酶结构域内含蛋白1 (chitinase domain containing 1,Chid1)基因剔除小鼠,观察小鼠表型和发育差异.设计了合适的基因剔除策略,成功构建了基因剔除打靶载体.以电穿孔方法将打靶载体导入ES细胞(embryonic stem cell),用G418和Ganciclovoir进行正负筛选,挑选抗药的阳性克隆,提取ES细胞基因组DNA,用长臂PCR鉴定出阳性ES细胞.将阳性ES细胞复苏培养后注入小鼠囊胚,获得嵌合体小鼠.嵌合体小鼠与C57BL/6J小鼠交配后获得Aguoti毛色的杂合子小鼠.在雌雄杂合子交配的后代中获得纯合子小鼠.从脑、脾脏、肝、肺的RNA水平鉴定来看,基因剔除小鼠的Chid1基因未表达,而杂合子、野生型小鼠有明显的该基因条带.经过初步的表型观察发现,Chid1基因剔除小鼠发育正常,未出现胚胎致死,交配繁殖能力无异常.几丁质酶结构域内含蛋白1(Chid1)基因剔除小鼠模型建立成功.Child1基因对于小鼠发育、生殖方面无明显作用.

关键词：几丁质酶结构域内含蛋白1、基因打靶、基因剔除

所属期刊栏目：35

资助基金：上海市自然科学基金09ZR1422600资助的课题

在线出版日期：2013-09-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：316-321