大鼠精原干细胞的高效分离和纯化方法

摘要：

精原干细胞是精子发生的基础,是永久分化成精子的克隆源,它既可以自我更新维持体内干细胞的数量,又可以增殖分化形成各阶段的生精细胞直至成熟精子.本文以22～25日龄Wistar-Iamichi大鼠为研究对象,利用两步酶消化法分离得到睾丸曲细精管细胞悬液,根据精原干细胞与曲细精管细胞悬液中体细胞(支持细胞及少量的管周细胞)及各级分化的生精细胞贴壁能力及对细胞外基质粘附力的不同,将大鼠精原干细胞进行纯化.经纯化后,5只大鼠的睾丸可以得到约3×105个精原干细胞,该精原干细胞在体外培养可形成克隆,并且该克隆可表达精原干细胞特异的标记基因GFRa1和CDH1.本文所介绍的高效分离和纯化大鼠精原干细胞的方法,操作简便,且得到的精原干细胞具有很高的活力和增殖能力,该方法为今后大鼠精原干细胞的长期培养及操作研究奠定了基础.

关键词：大鼠、睾丸、精原干细胞、分离和纯化

所属期刊栏目：33

分类号：Q2(细胞生物学)

资助基金：教育部春晖计划Z2007-1-01036;内蒙古自治区自然科学基金2009ZD05

在线出版日期：2011-12-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：543-547