可溶性纤维连接蛋白对SGC-7901细胞中PKA活性的影响

摘要：

本研究通过向SGC-7901细胞中加入可溶性纤维连接蛋白(fibronectin,FN)探讨可溶性纤维连接蛋白对PKA活性的影响.实验采用蛋白印迹技术检测可溶性FN在不同浓度及作用时间情况下对PKA Cα亚基表达水平以及PKA作用底物血管扩张刺激磷蛋白(vasodilator-stimulated phos phoprotein,VASP)磷酸化水平的影响;采用免疫荧光技术检测可溶性FN对PKA作用底物p-VASP分布的影响.结果显示,在SGC-7901细胞中,可溶性FN在0.5～8μg/ml浓度区间内,对PKA活性存在剂 量依赖性抑制效应;选取1μg/ml可溶性FN作用12 h以后,可溶性FN对PKA活性存在时间依赖性抑制效应;同时,我们建立了能够稳定表达人甲状腺A激酶锚定蛋白(human thyroid AKAP,Ht31)肽段的SGC细胞,Ht31破坏PKA锚定后,FN对PKA活性的抑制作用消失;免疫荧光显示可溶性FN可以使VASP磷酸化位置聚集于细胞边缘.因此,我们认为在SGC-7901细胞中可溶性FN对PKA活性存在抑制作用,这种抑制效应与可溶性FN的浓度及作用时间呈正比且取决于PKA能否正常锚定;可溶性FN可以影响PKA活化位置.

关键词：可溶性纤维连接蛋白、PKA、p-VASP、Ht31

所属期刊栏目：33

分类号：Q2(细胞生物学)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金

在线出版日期：2011-12-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：492-497