嗜热真菌热稳定性β-葡萄糖苷酶的克隆表达、纯化及酶学性质
从嗜热子囊菌光孢变种(Thermoascus aurantiacus var.1evisporus)中克隆出β-葡萄糖苷酶基因bgl Ⅱ的全长序列,GenBank注册号为EU263992.将该基因插入巴斯德毕赤酵母Pichia pastoris分泌型表达载体pPIC9K中以获得重组质粒,将重组质粒转导入毕赤酵母中,大量筛选后获得高效表达β-葡萄糖苷酶的酵母工程菌株.经甲醇诱导6 d,培养基中β-葡萄糖苷酶的活力可达0.23 U/mg.该酶的最适反应pH为5.0,最适反应温度为50℃.通过DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子层析纯化了该重组蛋白质.SDS-PAGE测得该重组蛋白质分子量约为118 kDa.
嗜热子囊菌光孢变种、表达、纤维素酶、毕赤酵母、纯化
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R3(基础医学)
国家高技术研究发展计划863计划2008AA05Z403,2006AA10Z304
2009-10-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共6页
535-540