山羊α-干扰素基因克隆、原核表达及其抗病毒活性研究

摘要：

为研究雷州山羊α-干扰素基因的遗传变异及重组α-干扰素的抗病毒活性,采用 RT-PCR 扩增雷州山羊α-干扰素基因,分析其核苷酸序列;采用 PCR方法扩增山羊α-干扰素基因成熟肽编码序列,构建原核表达载体 pET-mIFN-α,并在大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达;采用 SDS-PAGE 和 Western-blot 检测重组蛋白rG-mIFN-α;通过细胞病变抑制法测定其抗小反刍兽疫病毒(PPRV)和山羊痘病毒(GPV)活性.结果表明,雷州山羊α-干扰素全基因由 570 个核苷酸组成,编码 189 个氨基酸;与 GenBank 上发表的山羊、林麝、弯角大羚羊、黄牛、瘤牛、绵羊、猪、人和鼠的核苷酸序列同源性分别为 99.8%、95.6%、96.8%、94.7%、94.7%、96.8%、81.6%、77.8%和 70.0%;氨基酸序列同源性分别为 100%、92.6%、94.7%、92.1%、93.2%、93.7%、67.9%、61.6%和 55.3%,提示反刍动物α-干扰素基因的核苷酸和氨基酸序列高度保守;rG-IFNα主要以包涵体形式存在,分子质量约 32 ku;重组山羊α-干扰素能显著抑制 PPRV 和 GPV 感染引起的细胞病变,其抗PPRV和 GPV效价分别为 1.6×104 U/mg和 1.35×104 U/mg.

关键词：雷州山羊、α-干扰素(IFN-α)、序列分析、原核表达、抗病毒活性

所属期刊栏目：32

分类号：S852.65;Q78;Q943.2

在线出版日期：2023-08-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1151-1158