梨果黑斑病菌钙调磷酸酶基因生物信息学分析及其对侵染结构分化的调控作用

摘要：

为揭示梨果黑斑病菌Alternaria alternata CaN基因的调控作用,采用RT-PCR技术克隆A.alter nata CaN基因,利用在线工具对其基因及其编码蛋白进行生物信息学分析;同时分析其在A.alternata侵染结构分化过程中的表达特性;并进一步以钙调磷酸酶专一性抑制剂环孢菌素A(CsA)处理研究其对A.alter-nata侵染结构分化和致病性的影响.结果A.alternata克隆得到CNA和CNB基因,分别命名为AaCNA(GenBank NW_017306222)和 AaCNB(GenBank NW_017306193),生物信息学分析表明 AaCNA 和 AaCNB均无跨膜结构,且具有多个磷酸化位点,主要定位于细胞核上;AaCNA包括一个N端催化结构域、CNB结合结构域、钙调素CaM结合结构域和自抑制蛋白结构域,AaCNB具有4个EF-hand Ca2+结合位点.qRT-PCR分析表明,在疏水及果蜡诱导A.alternata侵染结构分化过程中AaCNA和AaCNB基因表达量均显著上调,且果蜡诱导作用更明显.药理学表明,环孢菌素A处理显著抑制疏水性和蜡质诱导的A.alternata孢子萌发和附着胞形成,同时还可抑制损伤接种A.alternata早酥梨黑斑病的扩展.综上结果表明AaCNA和AaC-NB 参与A.alternata侵染结构形成的调控.

关键词：梨果黑斑病菌、钙调磷酸酶、生物信息学分析、基因表达特性、环孢菌素A

所属期刊栏目：32

分类号：S831.1;S436.5;S572

资助基金：国家自然科学基金31860456

在线出版日期：2023-02-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：320-330