枸杞内生真菌NQ8GⅡ4菌株原生质体制备及再生条件研究

摘要：

以枸杞内生真菌Fusarium nematophilum NQG8Ⅱ4菌株为材料,利用单因素试验和响应面法对影响原生质体制备的4个因素(菌龄、酶解时间、酶质量浓度、稳渗剂浓度)进行优化,获得原生质体制备的最佳条件.确定酶解时间,酶质量浓度,稳渗剂浓度三因素对原生质体产量、原生质体再生率和有效原生质体量的组合效应.结果 表明,NQ8GⅡ4菌株原生质体制备的最佳条件为:过滤收集菌龄16 h的菌丝0.05 g于1 mL质量浓度为30.30 g/L崩溃酶+10 g/L溶壁酶的酶解液中反应2.5h;以0.713 mol/L NaCl为稳渗剂,原生质体产量平均为7.12×107 mL-1,再生率平均为5.56％,有效原生质体量平均为39.59×105 mL-1,与模型预测值拟合较好.获得枸杞内生真菌NQ8GⅡ4菌株原生质体制备的最佳条件,为该菌株在原生质体诱变、基因组重排、基因编辑技术等后续分子遗传学研究提供理论基础.

关键词：枸杞内生真菌、NQ8GⅡ4菌株、原生质体、响应面法

所属期刊栏目：29

分类号：S432.1(病虫害及其防治)

资助基金：国家自然科学基金31460484

在线出版日期：2020-12-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：1710-1719