菊芋叶绿体分离方法比较研究

摘要：

以菊芋叶片为材料,通过比较提取其叶绿体DNA的5种方法(改良高盐-低pH法、Percoll密度梯度离心法、GENMED试剂盒物理法、GENMED试剂盒化学法及DNaseⅠ差速离心分离法),筛选出适合菊芋叶绿体NDA的提取方法.利用显微镜、核酸蛋白测定仪、琼脂糖凝胶电泳及菊芋基因特异引物RAPD检测.结果 显示:改良高盐-低pH法分离得到的叶绿体在40×物镜下其数目多,浓度高,背景清晰,提取菊芋叶片cpDNA的OD260/OD280为1.926,质量浓度为295.63 μg/μL.经10 g/L琼脂糖凝胶电泳检测发现,cpDNA条带清晰整齐,无核DNA污染;且提取的cpDNA通过4对引物均能扩增到片段.结果 表明,改良高盐-低pH法能够快速获得菊芋高质量的叶绿体DNA.

关键词：改良高盐-低pH法、叶绿体基因组提取、叶绿体分离、菊芋

所属期刊栏目：28

分类号：S649

资助基金：国家自然科学基金31460523,31660569,31660588;青海省科技厅项目2016-ZJ-751

在线出版日期：2019-05-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：657-663