东方粘虫中肠V-ATP酶a亚基的克隆及原核表达

摘要：

对东方粘虫[Mythimna se parata (Walker)]中肠V-ATPase a亚基(MS-VA TPa)cDNA全长序列进行克隆、原核表达及纯化研究.采用RT-PCR和RACE技术克隆MS-VATPa基因,再亚克隆于原核表达载体pET-22b(+)以构建重组载体pET22 b-MS-VA TPa,将鉴定正确的重组质粒转入E coli BL21(DE3)进行IPTG诱导表达,采用Ni-NTA柱亲和层析法纯化目标蛋白,并进行SDS-PAGE和Western blot验证.结果表明:成功克隆东方粘虫中肠MS-VA TPa基因的cDNA全长序列,并实现MS-VAT Pa基因在大肠杆菌原核表达系统中的可溶性表达.

关键词：东方粘虫、昆虫V-ATP酶、基因克隆、原核表达、蛋白纯化

所属期刊栏目：27

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金31371958;杨凌示范区科技计划2017NY-09

在线出版日期：2018-08-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：915-922