番茄遗传转化与筛选鉴定的改进研究

摘要：

将At-pri-miR828基因的过表达载体pC2300-pOT2-At-pri-miR828通过农杆菌侵染法转入番茄(Solanum lycopersicum L.)品种‘Ailsa Craig'为例,来对番茄的遗传转化过程中番茄种子消毒处理、无菌苗培养、转基因阳性植株的Kan筛选浓度、PCR检测等方法进行研究,旨在探索一套快速高效的番茄遗传转化及鉴定方法.研究发现:采用C2H5OH、Na3PO3及NaClO分别浸泡及无菌水反复冲洗的种子消毒方法,可使污染率减少到5％以下;种子震荡培养法可以提高发芽率并促进种苗的生长势一致;筛选转基因阳性植株的Kan最佳质量浓度为100 mg·L-1;100 mg·L-1的Kan溶液浇灌蛭石和在MS培养基中添加Kan的方法都可以用来筛选转基因番茄.最终Kan筛选和PCR检测等鉴定方法显示番茄的遗传转化效率为32.5％.

关键词：番茄、种子消毒、遗传转化、Kan筛选

所属期刊栏目：27

分类号：S641.2

资助基金：国家自然科学基金31101555;山西农业大学研究生创新项目20143058;山西省高等学校优秀青年学术带头人项目2012;山西人才引进与开发专项614191;山西省农业科技成果转化和推广示范项目2018-5;山西农业大学科技创新基金2018.The National Natural Science Foundation of China31101555;the Shanxi Agricultural University Graduate Student Innovation Project20143058;the Shanxi Province Outstanding Youth Academic Leader Project2012;the Shanxi Talent Introduction and Development Special614191;Shanxi Provincial Agricultural Science and Technology Achievement Transformation and Extension Demonstration Project2018-5;Science and Technology Innovation Fund of Shanxi Agricultural University2018

在线出版日期：2018-06-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：554-561