东方粘虫中肠V-ATP酶A亚基突变体TSCA的原核表达及复性纯化

摘要：

根据得到的东方粘虫[Mythimna separate(Walker)]中肠V-ATPase A亚基(VHA-A)基因(VATPA),预测其三维结构,构建定点突变并复性.利用Swiss-Model在线预测VHA-A三维结构,确定突变位点,通过重折叠PCR(Overlap-PCR)技术构建突变基因并将其整合到pET-22b(+)载体上,得到重组质粒pET-22b(+)-TSCA,转入大肠杆菌BL21中表达,最后通过亲和层析纯化包涵体蛋白质并进行透析复性.结果表明,成功构建突变基因和融合表达载体,融合蛋白质以包涵体形式表达,并得到大量纯化的可溶性蛋白.

关键词：V-ATP酶A亚基、定点突变、原核表达、包涵体复性

所属期刊栏目：26

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：西北农林科技大学引进人才专项资金Z111021101;国家自然科学基金21403168.Special Talent Recruitment Fund of Northwest A&F UniversityZ111021101;the National Natural Science Foundation of China21403168

在线出版日期：2017-09-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1248-1252