绵羊肺炎支原体多表位融合基因MO-meAg1的构建、表达及重组蛋白免疫原性分析

摘要：

为获得具有良好免疫原性的绵羊肺炎支原体(MO)重组蛋白,利用ABCpred等软件预测分析MOEF-P、PDHA、P97相似蛋白和EF-Ts蛋白的优势线性抗原表位,构建多表位融合基因MO-meAg1,合成后将其亚克隆至表达载体pET-32a(+),构建原核表达载体pET-32a(+)-MO-meAg1.将pET-32a(+)-MO-meAg1转化至感受态细胞E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达后检测重组蛋白反应原性和免疫原性.SDS-PAGE结果显示,MO-meAg1重组蛋白分子质量约34.5 ku;Western blot分析结果显示,该重组蛋白可被MO阳性血清特异性识别,具有良好的反应原性.小鼠免疫试验结果表明,重组蛋白MO-meAg1具有较强的免疫原性,诱导机体产生的抗血清其间接血凝效价可达1∶128以上.获得的多表位融合蛋白MO-meAg1为绵羊支原体肺炎的免疫学诊断及新型疫苗研究奠定基础.

关键词：绵羊肺炎支原体、抗原表位、多表位融合基因、表达

所属期刊栏目：26

分类号：S858.26(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家国际科技合作专项2014DFR31310;国家自然科学基金31360596,30960274.The International Science and Technology Cooperation Program of China2014DFR31310;National Natural Science Foundation of China31360596,30960274

在线出版日期：2017-07-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：678-684