新疆多浪羊IFN-γ基因地高辛探针的标记与敏感性检测

摘要：

为获得多浪羊IFN-γ地高辛探针,并对其标记效率进行检测.将多浪羊pMD-18T-IFN-γ克隆菌进行PCR扩增,经切胶回收及目的基因浓缩后获得目的基因IFN-γ,然后用地高辛标记和检测试剂盒对IFN-γ基因进行标记,获得IFN-γ地高辛探针.IFN-γ的PCR扩增产物经8 g/L琼脂糖电泳分离后转移至HybondN+膜,膜上显影后进行敏感性检测并计算探针质量浓度,结果显示,IFN-γ地高辛探针在杂交液中的质量浓度为30 μg/L.Southern杂交显示,Hybond N+膜上有IFN-γ基因的双链DNA,且浓缩后的DNA(2.5μg)标记的特异性探针质量浓度较高,可以在Hybond N+膜上呈现出清晰的杂交条带,证明获得的探针质量浓度符合要求.

关键词：多浪羊、IFN-γ基因、地高辛、探针标记、检测

所属期刊栏目：25

分类号：S826(家畜)

资助基金：The National Natural Science Foundation of China30960277;the Applied Basic Research Projects of Xinjiang Production and Construction Corps2007JC07;the Headmaster Fund of Tarim University.国家自然科学基金30960277;新疆生产建设兵团应用基础研究2007JC07;塔里木大学校长基金TDZKCX201401

在线出版日期：2016-12-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1436-1441