绵羊肺炎支原体基因组DNA表达文库的构建与鉴定

摘要：

为了筛选绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovi pneumoniae,MO)免疫原性相关基因,提取MO基因组DNA,利用限制性内切酶Sau3AⅠ对基因组DNA进行酶切,回收500～3 000 bp的基因组DNA片段,用T4 DNA连接酶将其与经BamH Ⅰ酶切并去磷酸化处理的pET28a/b/c载体连接,然后转化至DH5α感受态细胞,通过菌液PCR对插入到载体中的片段大小及插入率进行鉴定.从转化的平板上提取质粒,转化至大肠杆菌BL21 (DE3)感受态细胞中,构建MO基因组表达文库.随机挑选单菌落,用pET28a/b/c通用引物进行PCR鉴定,结果显示插入片段大小为300～2 000 bp,插入率为90％,表明成功构建了MO基因组表达文库,该文库的构建为进一步筛选MO相关的免疫性基因及潜在候选疫苗靶点奠定前期基础.

关键词：MO、基因组表达文库、构建、鉴定

所属期刊栏目：25

分类号：S852.62(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家国际科技合作专项2014DFR31310;兵团国际科技合作计划2012BC006.International Science and Technology Cooperation Program of China2014DFR31310;International Science & Technology Cooperation of Xinjiang Production and Construction Corps2012BC006

在线出版日期：2016-07-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：646-651