玉米赤霉醇完全抗原的制备及质量鉴定

摘要：

旨在合成玉米赤霉醇(ZER)人工抗原,并用其免疫小鼠以获得含高滴度ZER多克隆抗体的小鼠血清,为ZER单克隆抗体的制备奠定基础.改造ZER第16位上的羟基,合成半抗原ZER-16-羧丙基丁醚,然后分别采用混合酸酐法和碳二亚胺(EDC)法将改造后的半抗原与载体蛋白BSA或OVA偶联,制备免疫原ZER-BSA和包被原ZER-OVA,并采用凝胶电泳、动物免疫对人工抗原进行质量鉴定,间接ELISA测定抗血清效价,间接竞争(阻断)ELISA测定抗血清的敏感性和特异性.结果表明,用制备的免疫原免疫小鼠血清效价均已达到1∶104以上.6号鼠的血清敏感性最高,对ZER的半数抑制质量浓度(IC50)达15.77 ng/mL,获得的血清除与α-玉米赤霉醇特异性反应外,与其结构类似物β-玉米赤霉醇、α-玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉烯醇、玉米赤霉酮、玉米赤霉烯酮分别有12.5％、100％、12.5％、25％、100％的交叉反应,与其他霉菌毒素交叉反应性均小于0.5％.表明试验成功获得ZER人工抗原,通过动物免疫制备敏感性好、特异性强的ZER多克隆抗体,为ZER单克隆抗体的制备及其免疫学检测方法的建立奠定基础.

关键词：玉米赤霉醇、完全抗原、多克隆抗体、ELISA

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分类号：R725.6(儿科学)

资助基金：国家“十二五”科技支撑计划2014BAD13B05;农业部公益性行业农业科研专项201203040.Sci-tech Project of the "12th Five-Year-Plan" of China2014BAD13B05;Special Fund for Agro-scientific Research in the Public Interest of Ministry of Agriculture201203040

在线出版日期：2016-07-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：637-645