巴什拜羊重组BPI蛋白的体外功能检测

摘要：

研究巴什拜羊重组杀菌性/通透性增加蛋白(recombinant bectericidal/permeability increasing protein,rBPI)的体外生物学特性.向体外培养的鼠脑内皮细胞MBECs(mouse brain endothelial cell)中加入rBPI,利用Annexin V FITC/PI染色法在荧光显微镜下鉴定凋亡细胞,再用琼脂糖凝胶电泳观察DNA ladder,以检测rBPI诱导MBECs凋亡的作用;在体外培养的绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,MO)中加入rBPI,利用real-time PCR技术检测rBPI对MO的抑制作用;在体外培养的大肠杆菌中加入rBPI,利用微量肉汤稀释法检测rBPI的抑菌作用;在体外培养的绵羊中性粒细胞中加入MO,利用real-time PCR技术检测BPI mRNA的表达水平.结果表明,Annexin V FITC/PI染色法可观察到凋亡早期细胞呈绿色,凋亡晚期或死亡细胞呈红色,在540 nmol/LrBPI浓度诱导作用下可见清晰的DNA ladder条带;rBPI作用于MO3h时,MO16S rRNA表达水平显著低于对照组(P＜0.05);20、40和80 mg/L的rBPI与阳性对照组相比均能够显著抑制大肠杆菌的生长(P＜0.05);绵羊中性粒细胞受到MO感染后3h和4h时表达BPI mRNA的水平均显著高于对照组(P＜0.05).

关键词：杀菌性/通透性增加蛋白、巴什拜羊、体外功能、细胞凋亡、绵羊肺炎支原体、大肠杆菌

所属期刊栏目：24

分类号：S854(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金31160525.Supported by the National Natural Science Foundation of China 31160525

在线出版日期：2015-12-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：10-16