SAHA处理供体细胞对山羊克隆胚胎早期发育的影响

摘要：

为探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂羟肟酸(SAHA)对体细胞和山羊核移植胚胎早期发育的影响,采用不同浓度SAHA处理山羊胎儿成纤维细胞(Goat embryonic fibroblasts,GEFs),并检测其AcH3K9水平、细胞增殖能力、细胞周期及胚胎发育情况、乙酰化水平、多能性基因的表达水平.结果显示,SAHA处理后GEFs的AcH3K9水平显著上升(P＜0.05),2.5 μmol/L SAHA处理浓度即可显著提高GEFs组蛋白H3K9的乙酰化水平;浓度≤2.5 μmol/L时,对细胞增殖能力无明显影响;浓度为5.0 μmol/L和10.0 μmol/L时,细胞活力显著下降(P＜0.05).AcH3K9上调会引起G0/G1和S期的细胞比例下降(P＜0.05).因此,选择经2.5μmol/L SAHA处理的供体细胞进行核移植.试验组的胚胎卵裂率和囊胚率显著高于对照组(P＜0.05),其卵裂率接近于卵胞质单精子注射(ICSI)组.试验组的囊胚率乙酰化水平显著高于对照组,且低于ICSI组(P＜0.05).与对照组相比,试验组囊胚的Oct4、Sox2和Nanog的mRNA表达水平均上升(P＜0.05),且均接近于ICSI组.说明,选用2.5 μmol/L SAHA处理供体细胞可提高体细胞核移植效率和胚胎品质.

关键词：羟肟酸、H3K9乙酰化、克隆胚胎、胎儿成纤维细胞、山羊

所属期刊栏目：24

分类号：Q954.4(动物学)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2011AA100303

在线出版日期：2015-12-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1-8