小麦TaSPL17基因的克隆、组织特异性表达及原核表达分析

摘要：

具有SBP结构域的SPL(SQUAMOSA promoter-binding protein-like)蛋白是一类植物特有的转录因子,在植物的生长发育过程中发挥重要的调控作用.为了进一步研究小麦基因TaSPL17的功能,本研究通过同源克隆的方法,从普通小麦品种‘小偃22’中克隆得到TaSPL 17基因全长CDS序列.生物信息学分析表明,该基因开放阅读框长度1 158 bp,编码385个氨基酸,理论分子质量40.25 ku,理论等电点为9.12.半定量RT-PCR结果显示,TaSPL17在小麦根、茎基部、叶片、幼穗中均有表达,在幼穗和茎基部中表达量最高,根次之,在叶片中表达量最少,表明TaSPL17基因可能与小麦的分蘖和穗部的发育有关.将基因TaSPL17与载体pGEX6P-1连接构建原核重组表达载体pGEX6P-1-TaSPL17,然后将其转入大肠杆菌DH5α并对诱导表达的时间、IPTG浓度、温度进行优化,SDS-PAGE分析表明,融合GST标签的TaSPL17在温度37 C,IPTG浓度为0.4 mmol/L,诱导3h后表达量最大,有助于进一步纯化TaSPL17蛋白质.

关键词：小麦(Triticum aestivum)、TaSPL17、基因克隆、组织特异性表达、原核表达

所属期刊栏目：24

分类号：S512.1(禾谷类作物)

资助基金：陕西省农业科技攻关项目2013K02-01;高校基本科研业务经费QM2012004;国家转基因生物新品种培育科技重大专项2208ZX080022003

在线出版日期：2015-12-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：37-43