橡胶延伸因子REF基因的克隆、转化及功能分析

摘要：

取巴西橡胶树新鲜橡胶胶乳,利用改良CTAB法提取胶乳总RNA,反转录合成cDNA.根据GenBank中REF基因序列的报道,设计特异性引物,Taq酶扩增,获得REF基因并构建DHN pBin 438-REF植物表达载体.利用叶盘转化法侵染橡胶草无菌幼嫩叶片,通过RT-PCR方法鉴定阳性植株,对其可溶性糖、胶乳和蛋白质含量等进行检测.结果表明,转基因橡胶草可溶性糖质量浓度为0.053 8 g/L,约是野生型橡胶草的2倍;橡胶是野生型植株橡胶的1～3倍;而转基因橡胶草中REF基因在蛋白质水平高效表达,其中根和花梗中REF基因高效表达.本研究通过农杆菌介导的遗传转化,获得5株阳性转基因橡胶草植株,分子生物学结果表明,REF基因可在橡胶草中稳定表达,并显著地提高橡胶草中合成天然橡胶的生物量.

关键词：橡胶草、REF基因、克隆、橡胶

所属期刊栏目：24

分类号：Q943;S576(植物学)

资助基金：国家自然科学基金31360060

在线出版日期：2015-12-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：144-150