10.7606/j.issn.1004-1389.2014.12.002
绵羊肺炎支原体HSP70基因的克隆、表达及免疫原性分析
根据GenBank登录的MO HSP70基因序列,设计特异性引物对MO新疆分离株HSP70基因进行扩增,克隆入T载体中测序.将HSP70基因亚克隆入表达载体pGEX 4T-1,构建重组表达载体pGEX4T-1-HSP70,并转化入大肠埃希氏菌BL21 (DE3),用IPTG进行诱导重组菌,SDS-PAGE和Western blot分析表达产物.SDS-PAGE分析证实表达的重组融合蛋白分子质量为53 ku;Western blot分析表明该重组蛋白可与MO阳性血清发生特异性免疫学反应,证实表达的重组HSP70具有良好的反应原性.重组HSP70蛋白免疫小鼠后可诱导机体产生特异性抗体,证实该重组蛋白具有良好的免疫原性.
MO、HSP70基因、载体构建、原核表达
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S852.62(动物医学(兽医学))
国家国际科技合作专项2014DFR31310;兵团国际科技合作计划2012BC006
2015-12-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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