摇蚊基因组DNA提取及COⅠ基因克隆与序列分析

摘要：

以羽摇蚊和溪流摇蚊4龄幼虫为材料,分别采用CTAB法、KAc法和SDS-蛋白酶K法提取基因组DNA.通过电泳、紫外光谱分析和COⅠ-PCR扩增等检测手段比较分析DNA质量.结果表明,SDS-蛋白酶K法提取的DNA质量优于CTAB法和KAc法,适用于PCR扩增.对2种摇蚊细胞色素氧化酶Ⅰ亚基基因(COⅠ基因)进行克隆、测序(GenBank登录号为KF833366,KF833367和KF833368)和分析.结果显示,凭证标本号为xjq1和xjq2的羽摇蚊和凭证标本号为mnh1的溪流摇蚊的CO Ⅰ基因序列长度分别为654 bp、669 bp和528 bp,GC含量分别为37.3％,37.1％和34.5％.与已报道的摇蚊COⅠ基因序列在片段长度,组成和GC含量上具有一致性.采用NJ法构建的系统发育树清晰地将双翅目长角亚目下摇蚊科、蚊科和瘿蚊科各科昆虫有效分开,这与传统的分类结果高度一致,显示线粒体DNA COⅠ基因可以用于摇蚊昆虫种类的分子鉴定.

关键词：羽摇蚊、溪流摇蚊、基因组DNA提取、COⅠ基因、克隆、序列分析

所属期刊栏目：23

分类号：Q961(昆虫学)

资助基金：国家自然科学基金31101675

在线出版日期：2015-12-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：143-149