用转座子TnYLB-1构建枯草芽孢杆菌EDR4突变体库

摘要：

为筛选枯草芽孢杆菌EDR4拮抗相关基因,利用转座子TnYLB-1构建该菌株的插入突变体库.通过对种子液OD600值、转接培养液Ⅰ继续培养OD600值及转接培养液Ⅱ后的孵育时间3因素设计正交试验,转化过程中加入pMarA质粒的不同量及质粒与感受态细胞共培养的不同时间研究2因素对转化效率的影响,确定pMarA对EDR4的转化体系.通过50℃高温诱导培养产生EDR4的插入突变体,挑取单菌落2 756个,构建EDR4的插入突变体库,随机挑选14株突变体经PCR检测转座子TnYLB-1序列,发现转座子已成功插入到EDR4基因组中;进一步通过Southern杂交验证,发现转座子TnYLB-1主要以单拷贝形式随机插入,也有部分多拷贝插入.此突变体库的建立可为以后筛选该菌株拮抗相关基因等研究奠定基础.

关键词：枯草芽孢杆菌、转化、转座子TnYLB-1、pMarA质粒、转座诱变、突变体库

所属期刊栏目：23

分类号：S436.634(病虫害及其防治)

资助基金：公益性行业农业科研专项201103016;陕西省自然科学基金2013JM3002;高等学校学科创新引智计划B07049

在线出版日期：2015-12-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：123-129