感染甘蔗花叶病毒甘蔗叶片cDNA文库的构建及评价

摘要：

为了研究甘蔗(Saccharum officinarum L.)与甘蔗花叶病毒(Sugarcane mosaic virus,SCMV)的互作机制,构建感染SCMV的甘蔗叶片的酵母双杂交cDNA文库.以热带种Badila为供试材料,提取感染SCMV植株的叶片总RNA,分离纯化获得mRNA,通过反转录反应合成3种读码框的双链cDNA.用Gateway技术,通过BP和LR反应,将cDNA迅速重组到酵母双杂交载体pGADT7-DEST上,构建酵母双杂交文库.结果表明,文库容量为2.0×107cfu,随机挑取24个克隆检测,重组率为100％,cDNA插入片段长度主要分布在1 kb～2 kb,文库质量较好.说明该文库的构建为筛选与SCMV互作的甘蔗寄主因子基因,研究甘蔗与SCMV的互作机制及甘蔗抗花叶病育种奠定基础.

关键词：甘蔗花叶病毒、酵母双杂交、cDNA文库

所属期刊栏目：23

分类号：S435.121(病虫害及其防治)

资助基金：国家863课题2013AA102604;国家自然科学基金31171605,31371688

在线出版日期：2015-12-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：79-84