10.7606/j.issn.1004-1389.2014.10.006
冷冻保护剂对犊牛睾丸组织标志性酶活性的保护作用
为了探讨犊牛睾丸组织适宜的冷冻保存体系,设计以甘油、DMSO、乙二醇、海藻糖、BSA和睾丸液作为主要成分的6种冷冻保护液,以碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)、乳酸脱氢酶(LDH)和β-D葡萄糖苷酶(β-D-Glucosidase)的酶活性作为测定指标,以新鲜犊牛睾丸组织的4种酶活性为空白对照,使用6种冷冻保护液将睾丸组织于液氮中冷冻保存7d,然后37℃水浴解冻并无菌培养24 h,再制备成(Ψ)=10%的睾丸组织匀浆液并测定4种酶活性,最后分析6种冷冻保护液对犊牛睾丸组织标志性酶活性的冷冻保护效果.结果表明,含ρ=0.015 g/mL牛血清白蛋白(BSA)的冷冻保护液冷冻7d后,睾丸组织AKP、ACP、LDH和β-D葡萄糖苷酶的活性分别为599.99、129.11、1 891.53和489.98 U/g,均显著优于其他组(P<0.05);含ρ=0.04g/mL海藻糖的冷冻保护液冷冻7d后,AKP、ACP、LDH和β-D葡萄糖苷酶活性分别为454.88、114.63、1 862.79和457.8 U/g,其保护效果次于0.015 g/mL BSA组,但均显著优于其他组(P<0.05);经DMSO、乙二醇和睾丸液冷冻7d后,4种标志性酶的活性均低于0.015 g/mL BSA组和0.04 g/mL海藻糖组,甘油组冷冻保护液的效果最差.因此,含ρ=0.015 g/mL BSA和ρ=0.04 g/mL海藻糖的冷冻保护液能够较好地保护犊牛睾丸组织的酶活性,是犊牛睾丸组织适宜的冷冻保护剂.
犊牛睾丸组织、冷冻保存、冷冻保护剂、酶活性
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S814.8(普通畜牧学)
西北农林科技大学基本科研业务费专项资金QN2011061;西北农林科技大学大学生创新创业训练计划项目1310712016
2015-12-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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