甘蓝型油菜WRI1基因cDNA克隆与种子特异性表达载体的构建

摘要：

WRI1基因所编码的转录因子参与糖酵解和脂肪酸合成,在种子油的积累过程中起着关键作用.在种子中超表达WRH基因,对提高油菜种子含油量具有重要意义.本研究利用RT-PCR技术,从甘蓝型油菜湘油15号cDNA中分离克隆了5个WRI1基因全长cDNA序列,选取2种存在明显差异(碱基缺失)的cDNA序列构建植物种子特异性表达载体.为后续转基因研究这种差异是否会造成WRH基因在提高含油量作用上的差异作准备.通过双酶切和连接反应,分别将WRI1基因和napin启动子基因插入到pBI121载体的GUSA基因和CaMV35启动子基因位置.酶切及PCR检测结果显示,napin启动子和WRI1已插入相应位置,完成2种载体种子特异性表达WRI1基因重组载体pBI121+napin+WRI1的构建,命名为pBI121NW2、pBI121NW4.

关键词：甘蓝型油菜、WRI1、克隆、种子特异性表达载体

所属期刊栏目：23

分类号：Q812(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家863课题2012AA101107-3;湖南省科技厅课题2007RS4014

在线出版日期：2015-12-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：120-125