豚鼠胎儿成纤维细胞的分离培养及生物学特性分析

摘要：

为建立豚鼠成纤维细胞系,分离培养豚鼠胎儿成纤维细胞,并对其进行细胞活力、生长曲线、细胞周期及基因转染等分析.结果表明,豚鼠胎儿成纤维细胞在10代以内时形态良好,随着传代次数的增加,梭型细胞有拉长趋势,至第20代时梭形明显拉长,单位面积细胞数目大量减少.同时,细胞冻存后复苏贴壁情况良好.EGFP基因转染的成纤维细胞形态特征及生长状态与未转染细胞相似,转基因细胞和未转基因细胞的生长曲线均为S形,符合体外培养细胞正常生长增殖规律.以流式细胞仪分析逆转录病毒介导的EGFP基因转染细胞,可见染色体核型仍为二倍体,说明感染的细胞保持其遗传稳定性.流式细胞仪检测转染后不同时间点收集的病毒液感染的细胞效率,结果显示,病毒转染48 h、72 h收集病毒液组感染效率分别为16.9％和11.6％,显著高于24 h收集病毒液组(0.9％).

关键词：豚鼠、胎儿成纤维细胞、分离培养、EGFP基因、逆转录病毒

所属期刊栏目：22

分类号：Q28(细胞生物学)

资助基金：国家重点基础研究发展规划9732012CB126300,2012CB518801;国家自然科学基金31260287,31201867

在线出版日期：2015-12-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：174-180