A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1的表达纯化及活性检测

摘要：

为获得具有活性的A型FMDV VP1蛋白,以A型vp1重组质粒pMD19T-A-vp1为模板,利用PCR扩增得到A型FMDV vp1基因片段,将此基因片段与原核表达载体pET28a连接,构建重组质粒pET-Avp1.经IPTG诱导表达含重组质粒pET-A-vp1的E.coli BL21 (DE3)菌后,SDS-PAGE显示VP1蛋白以包涵体形式获得高效表达,蛋白分子质量约为29 ku.通过对IPTG浓度及诱导时间进行优化,结果表明,在37 C条件下,IPTG终浓度为0.3 mmol/L,诱导表达6h后,VP1蛋白的表达量最大.Western-Blot分析表明,VP1重组蛋白能够被A型口蹄疫阳性血清特异性识别.ELISA检测结果显示,VP1包涵体蛋白经洗涤纯化,尿素浓度梯度透析复性后具有较高的活性.

关键词：A型口蹄疫病毒、VP1蛋白、原核表达、蛋白纯化、活性鉴定

所属期刊栏目：22

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：NSFC-河南人才培养联合基金U1204327;河南省级重点实验室建设专项122300413217

在线出版日期：2015-12-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：7-12