沙门菌、巴氏杆菌和大肠埃希菌多重PCR检测方法的建立
旨在建立一种可以应用于临床样本同时检测沙门菌、多杀性巴氏杆菌和大肠埃希菌感染的多重PCR方法.根据NCBI上已收录的沙门菌hut基因、多杀性巴氏杆菌kmt1基因和大肠埃希菌23SrRNA基因的全基因序列,设计并合成3对特异性引物,通过优化多重PCR反应条件,建立能够同时检测3种细菌混合感染的多重PCR诊断方法.特异性分析表明,应用该方法可以从沙门菌、多杀性巴氏杆菌和大肠埃希菌以及3种细菌的混合物中扩增出3条大小分别为286 bp、457 bp和652 bp的特异性条带,其他对照组检测结果均为阴性;敏感性分析表明,该方法对沙门菌、多杀性巴氏杆菌和大肠埃希菌的最低检出量分别为1.77×104、1.99×104、2.01×104 CFU/mL;人工模拟感染样本检测表明,该方法能从混合感染的病料中检测出3种病原菌.可见:所建立的多重PCR方法具有特异性强,敏感度高,稳定性好的特点,可以有效检测沙门菌、多杀性巴氏杆菌和大肠埃希菌的混合感染.
沙门菌、巴氏杆菌、大肠埃希菌、多重PCR
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S852.61(动物医学(兽医学))
国家级大学生创新创业训练计划项目1210712042
2015-12-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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