益生菌FGM葡萄糖激酶基因(glcK)在黄芪发酵中的表达

摘要：

旨在分析益生菌FGM在黄芪发酵过程中的生长动态,为阐述其作用机理奠定基础.采用平板计数法对益生菌FGM在黄芪发酵中的生长动态进行检测,同源克隆法克隆糖酵解途径中的限速酶葡萄糖激酶glcK基因序列,并运用SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR技术分析其在黄芪发酵不同阶段的表达水平.结果表明:成功克隆得到glcK基因一段382 bp的片段(GenBank登录号JX976291),其序列一致性为83％～85％.实时荧光定量PCR结果显示,在FGM发酵6h内,glcK基因表达上调且呈逐渐上升趋势,至对数期后期6h表达水平达到最高(4.63倍)；稳定期初期8h时表达水平显著下降(P＜0.05),10h至发酵结束基因表达下调.可见:在黄芪发酵6h内FGM处于对数生长期,葡萄糖经糖酵解途径代谢产生ATP供细菌生长代谢利用,10 h后开始进入稳定期并进行次级代谢.

关键词：黄芪、非解乳糖链球菌、发酵、葡萄糖激酶、基因克隆、实时荧光定量PCR

所属期刊栏目：22

分类号：S853.2(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金31072162;国家行业农业科研专项201303040;公益性研究所基本科研费1610322011007

在线出版日期：2015-12-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

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