黄牛、牦牛和犏牛睾丸组织Dazl基因实时荧光定量PCR检测方法的建立

摘要：

为了检测黄牛、牦牛和犏牛睾丸组织Dazl基因mRNA表达水平.利用GenBank中牛Dazl mRNA序列,在其保守区设计并合成特异性引物,以牛肌动蛋白基因(β-actin)为内参,建立实时荧光定量PCR方法.结果表明,在100～10-6 7个拷贝量重组质粒稀释范围内,Dazl和β-actin基因的Ct值与重组质粒的含量均呈良好的线性关系,相关系数均大于0.999.熔解曲线产物为特异的单峰,具有较高的灵敏度和特异性.Dazl基因重组质粒最小检出含量达到10拷贝/μL,批内变异系数保持在1.351％以内,批间变异系数保持在3.217％以内,重复性较好.Dazl基因的mRNA表达量在犏牛睾丸组织中最低,这一分布可能与犏牛精子发生过程中减数分裂调控作用相关.

关键词：犏牛、雄性不育、Dazl、荧光实时定量PCR

所属期刊栏目：22

分类号：S823.8(家畜)

资助基金：国家星火计划2010GA870003;青海省科技计划项目2010-Z-718;青海省犏牛示范项目青农函[2010]395号

在线出版日期：2015-12-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：12-18