ω-3脂肪酸脱氢酶基因Fat-1的真核表达载体构建与表达

摘要：

培养线虫(Caenorhabditis elegans),提取RNA并通过PT-PCR获得其or3脂肪酸脱氢酶基因Fat-1,整合入真核表达载体,构建了哺乳动物细胞表达载体pFat-IRES2-GFP,转染牛胎儿成纤维细胞系并对其进行G418筛选获得稳定转染细胞株.对稳定转染Fat-1细胞株的RT-PCR分析及脂肪酸组成的HPLC分析结果表明,Fat-1基因已经整合入牛基因组中,并能够表达和发挥其ω-3脂肪酸脱氢酶的作用,促使ω-6PUFAs转变为相应的ω-3 PUFAs.ω-6脂肪酸总量从35.60%下降到25.47%,ω-3 PUFAs总量从5.75%上升到12.33%,多不饱和脂肪酸的比值从正常细胞中的6.19下降到阳性细胞中的2.0 7,说明Fat-1基因整合是成功的,能够在细胞中以相应的ω-6 PUFAs为底物合成ω-3 PUFAs.

关键词：ω-3脂肪酸脱氢酶、不饱和脂肪酸、真核表达载体、牛胎儿成纤维细胞

所属期刊栏目：20

分类号：Q782;S823.9(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家重大课题2008ZX08007-004

在线出版日期：2011-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：18-23