PCV2衣壳蛋白肽段的表达及其血清抗体间接ELISA检测方法

摘要：

利用可溶性重组PCV2-Cap蛋白肽段为抗原,建立PCV2血清抗体间接ELISA诊断方法(rhcapELISA).将PCV2 cap基因中含主要表位的片段克隆到表达载体pGEX-6p-1上,转化E.coli,降低诱导温度至18℃诱导,获得大小为34 ku的可溶性融合蛋白.Western blotting试验证实该融合蛋白具有很强的免疫学活性,通过亲和层析柱对可溶性蛋白进行纯化.用融合表达的可溶性蛋白肽段作为抗原,建立猪圆环病毒(PCV2)血清抗体间接ELISA诊断方法.该方法的交义反应结果表明,重组抗原与PRRSV、CSF、PPV和PRV阳性血清之间不存在交叉反应;用rhcap-ELISA和商品化的同类试剂盒(PCV2-Ab-Kit)检测137送检血清样品,2种试剂盒的阳性检测率分别为79.56%和83.21%.因此,rhcap-ELISA猪圆环病毒抗体检测试剂盒具有良好的敏感性和特异性,适合于在大规模的PCV2血清抗体的检测工作中使用.

关键词：圆环病毒2型、可溶性表达、ELISA、抗体检测

所属期刊栏目：20

分类号：S855.3(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家科技支撑计划2006BAD06A012

在线出版日期：2011-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1-7