蓝莓ISSR-PCR反应体系建立与优化

摘要：

以蓝莓为材料,通过正交试验设计和单因子优化试验对影响ISSR-PCR扩增结果的5个因素进行探讨,建立了适合蓝莓ISSR-PCR分析的反应体系和扩增程序,即在50 μL反应总体积中,包含模板DNA 20 ng、ISSR引物0.4 μmol·L-1、dNTPs 0.15 mmol·L-1、Mg2+1.5 mmol·L-1、1.25 U Taq DNA聚合酶和10×buffer 5.0 μL.扩增程序为:94 ℃预变性5 min;94 ℃变性30 s,47 ℃退火30 s,72 ℃延伸1 min,30个循环;72 ℃延伸7 min.该体系的建立为利用ISSR标记进行蓝莓遗传分析奠定了基础.

关键词：蓝莓、ISSR、反应体系、优化

所属期刊栏目：19

分类号：Q949.772.3(植物学)

资助基金：南京市科技局项目200501016;江苏省教育厅项目05KJD210077;金陵科技学院项目07JIT025

在线出版日期：2011-04-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：134-137