猪瘟病毒p80基因丝氨酸蛋白酶功能区的原核表达及小鼠免疫试验

摘要：

根据已发表的猪瘟病毒Alfort株的全基因组序列,设计2对引物以Shimen细胞毒株为材料,一步法提取总RNA,利用RT-PCR和套式PCR,成功扩增出p80全长基因,包括丝氨酸蛋白酶以及NTPase/RNA解旋酶功能区,大小约为2.0kb.将p80基因中的丝氨酸蛋白酶基因克隆到原核表达载体pET-32a中,获得重组质粒pET-p80.将重组质粒转化大肠杆菌Rosetta(DE3)中,IPTG诱导表达得到分子量约为43ku的目的蛋白,与理论大小相符.将菌体蛋白经Ni柱纯化,获得纯化重组p80蛋白,Western blot检测表明,表达的目的蛋白能与CSFV阳性血清发生反应.用纯化的p80蛋白免疫Bal b/c小鼠,成功制备了抗p80蛋白的抗血清.

关键词：猪瘟病毒、p80基因、原核表达、免疫

所属期刊栏目：16

分类号：S852.651(动物医学（兽医学）)

资助基金：农业部重点实验室基金;西北农林科技大学博士科研启动经费01140507

在线出版日期：2008-01-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：14-18