实时荧光定量PCR技术在检测外源基因拷贝数中的应用

摘要：

通过对PCR法、Southern Blot法、IPCR法与实时荧光定量法4种转基因外源基因检测方法的比较认为:PCR扩增虽十分灵敏,但有时会出现假阳性扩增,因而对外源基因是否整合还需进行验证.Southren方法准确性高,特异性强,但存在费时、费力的缺点.同时实际操作中就需要较大量的植物材料来提取DNA,而转基因植物的愈伤组织在无菌条件下经过筛选、重新分化后,一般都比较细弱,不宜大量取样.IPCR法虽可以转座突变分离基因,但当转座子作为外源基因通过农杆菌介导等方法导入植物时,由于T DNA整合到染色体中引起插入突变并分离基因造成误差.实时定量PCR技术的特异性和高信噪比为转基因拷贝数定量提供了方便,实时定量PCR法,花费试剂少、节省劳力和时间,需要DNA样品量少、并不进行放射检测.同时对实时荧光定量PCR法计算进行了详细介绍.

关键词：实时荧光定量PCR、外源基因、拷贝数

所属期刊栏目：14

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：科技部专项基金jy03-b-23-02;国家农业结构调整重大技术专项基金2002-02-01A

在线出版日期：2006-02-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：78-82