库尔勒香梨的苹果褪绿叶斑病毒cDNA探针检测技术研究

摘要：

以库尔勒香梨叶片和皮层为材料,对两种植物总RNA提取方法进行了比较研究,从中筛选出了适合库尔勒香梨的提取方法;并利用RT-PCR反应体系成功合成了生物素标记的cDNA探针,在此基础上,对影响杂交灵敏度的主要因素进行了实验研究.结果表明,当探针浓度为400 ng/mL,甲酰胺浓度为45%,42 C杂交反应6 h,可获得最高灵敏度.Tween20的封闭效果比牛血清白蛋白好.对不同组织和不同提取方法提取的总RNA进行了杂交检测,并对库尔勒地区香梨带毒情况进行了检测.结果表明,不论幼叶、老叶、皮层及冷冻叶片均可出现杂交信号,两种提取方法提取的总RNA也都出现了杂交信号,库尔勒香梨样品有45%的带苹果褪绿叶斑病毒.

关键词：库尔勒香梨、苹果褪绿叶斑病毒、cDNA探针

所属期刊栏目：14

分类号：S436.612.1+9(病虫害及其防治)

资助基金：国家自然科学基金30060053;30360066;教育部科学技术研究项目02180;兵团科委资助项目NKB02SDXNK01SW;国家科技攻关项目2003BA546C

在线出版日期：2005-06-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：58-63