犬瘟热病毒反转录—聚合酶链反应检测方法的建立及初步应用

摘要：

根据GenBank中Barrett报道的犬瘟热病毒弱毒株Onderstepoort的血凝蛋白基因序列，设计合成了一对能扩增760 bp基因片段的引物。用异硫氰酸胍-酚-仿一步抽提法提取细胞总RNA进行反转录，再以此产物为模板进行PCR扩增，筛选出最佳扩增条件。结果以此对引物进行PCR扩增能得到与设计片段大小相同的产物，并且不扩增犬细小病毒、犬I型腺病毒、犬冠状病毒、狂犬病病毒的核酸。敏感性试验证实，此法能扩增出稀释1 000倍的CDV强毒细胞培养物（105.1TCID50/0.1 ml）的反转录产物，其敏感性远高于电镜负染和荧光抗体染色法。经初步应用表明，此法可用于犬瘟热的临床诊断和实验研究。

关键词：犬瘟热病毒、反转录—聚合酶链反应

所属期刊栏目：10

分类号：Q503(一般性问题)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：51-54,66