10.13207/j.cnki.jnwafu.2019.11.009
苹果类泛素蛋白MdRAD23C2基因的分离及功能鉴定
[目的]研究苹果类泛素蛋白RAD23基因(MdRAD23C2)的功能,为抗旱苹果新品种的培育奠定基础.[方法]以秦冠苹果(Malus domestica cv.‘Qinguan’)为材料,克隆MdRAD23C2基因,对其进行生物信息学和定位分析,通过实时定量PCR分析其在不同逆境胁迫下(干旱、盐、碱和ABA)的表达模式.构建过表达载体转化农杆菌,采用叶盘法转化烟草,选取相应的转基因烟草株系,分析干旱胁迫下转基因烟草的相对电导率和丙二醛、叶绿素、过氧化氢(H2 O2)、超氧阴离子(O2(-·))含量以及二氨基联苯胺(DAB)、氮蓝四唑(NBT)染色情况,探讨MdRAD23C2过表达对转基因烟草抗旱能力的影响.[结果]苹果MdRAD23C2基因编码序列长1 146 bp,编码381个氨基酸,其定位于细胞核和细胞膜中,可响应干旱、盐和碱等逆境胁迫.干旱处理2周,野生型烟草株系萎蔫程度明显,且DAB和NBT染色加深,相对电导率、丙二醛、H2 O2和O2(-·)含量均极显著高于转基因型烟草,而叶绿素含量极显著低于转基因型烟草,说明过量表达MdRAD23C2的烟草株系对干旱胁迫的耐受性明显增强.[结论]分离克隆了苹果MdRAD23C2基因,该基因可提高转基因植物对于旱胁迫的耐受性.
类泛素蛋白、秦冠苹果、转基因烟草、干旱胁迫、抗旱育种
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S661.1;Q78(果树园艺)
国家自然科学基金项目31601737;中央高校基本科研业务费项目2452015019;陕西省博士后科学基项目2016-BSHED-ZZ118;国家苹果产业技术体系项目CARS-27;陕西科技攻关项目“渭北旱地苹果园深层土壤干燥化形成机理与调控”2016NY-070
2019-10-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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