杜仲Fls基因的克隆及原核表达

摘要：

[目的]克隆杜仲黄酮醇合成酶基因(Fls)全长,对其开放阅读框(ORF)进行原核表达分析.[方法]以杜仲叶片为材料提取总RNA,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆杜仲Fls基因;Fls基因的ORF经限制性内切酶酶切,构建其原核表达载体pET-28a-Fls;最后利用IPTG诱导Fls基因在大肠杆菌BL21 (DE3)中表达.[结果]获得了黄酮醇合成酶基因全长序列,长度为1 220 bp,ORF为1011 bp,编码336个氨基酸;成功构建了原核表达载体pET-28a-Fls;利用IPTG诱导Fls在BL21 (DE3)中表达,SDS-PAGE电泳结果显示,在约44 ku处有特异性的蛋白条带出现.[结论]获得了杜仲Fls基因的全长和ORF,并成功对其进行了原核表达.

关键词：杜仲、基因克隆、Fls基因、原核表达

所属期刊栏目：42

分类号：Q943.2(植物学)

资助基金：林业公益性行业科研专项“杜仲分子育种关键技术研究”201204605

在线出版日期：2016-05-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：102-108,116