扶桑绵粉蚧钙调蛋白基因的原核表达与表达谱分析

摘要：

[目的]探究我国重要入侵生物扶桑绵粉蚧(Phenacoccus solenopsis Tinsley)钙调蛋白基因(PsCam)在各虫态中的表达差异及PsCam蛋白在体外的异源表达,为进一步揭示PsCam的生理功能提供参考.[方法]克隆PsCam基因的ORF,推导其编码的氨基酸序列,采用生物信息学方法,分析扶桑绵粉蚧钙调蛋白的结构.构建PsCam原核表达载体,将其转化到大肠杆菌中进行诱导表达,并对产物进行纯化.采用实时荧光PCR方法,分析该基因在扶桑绵粉蚧各个虫态中的相对表达量.[结果]扶桑绵粉蚧钙调蛋白基因的氨基酸序列分析结果显示,该蛋白没有信号肽,具有2个EF-hand钙结合结构域,有13个Ca2+结合位点.成功构建了原核表达载体pET28a-PsCam,经诱导表达后获得了重组的Cam蛋白,目的蛋白的分子质量约为17 ku.PsCam mRNA在不同虫态的扶桑绵粉蚧中都有表达,在成熟雌虫中的表达量最低,在1龄幼虫中的表达量最高,是成熟雌虫的7.1倍.[结论]在原核表达系统中诱导表达了重组PsCam蛋白;PsCam基因在扶桑绵粉蚧不同虫态中差异表达.

关键词：扶桑绵粉蚧、钙调蛋白、基因表达谱、原核表达

所属期刊栏目：41

分类号：Q969.36+9.4(昆虫学)

资助基金：农业部公益性行业科研专项201103026;仲恺农业工程学院科研基金项目G3100004

在线出版日期：2016-05-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：138-142