人成纤维细胞生长因子-21的拟南芥油体表达系统构建
【目的】利用拟南芥（Arabidopsis thaliana）油体系统表达人成纤维细胞生长因子-21（Fibroblastgrowth factor-21,FGF21）,为利用植物油体表达系统规模化生产FGF21奠定基础。【方法】以磷酸甘露糖异构酶（PMI）基因作为转基因植物的安全筛选标记,将带有组氨酸标签的人源FGF21基因与大豆油体蛋白基因融合,克隆至大豆油体蛋白启动子驱动的表达载体pCAMBIA1390MDo（p1390MDo）上,构建植物双元表达载体p1390MDoFGF21。采用冻融法将植物双元表达载体p1390MDoFGF21转入农杆菌GV3101,花粉管导入法转化拟南芥,采用PCR检测、Southern blot筛选转基因拟南芥阳性植株（T0）,并对FGF21蛋白在转基因拟南芥种子（T1）中的表达进行Western blot分析。【结果】成功构建了带PMI安全筛选标记的植物双元表达载体p1390MDoFGF21。PCR扩增和Southern blot分析结果表明,重组FGF21融合基因以单拷贝和多拷贝2种方式已整合到转基因拟南芥基因组中。BandScand 5.0软件和Western blot分析结果显示,FGF21融合蛋白约占转基因拟南芥种子可溶性蛋白的3.76%,并具有良好的免疫原性。【结论】FGF21融合基因已经转入拟南芥中,并在以PMI为选择标记的转基因拟南芥种子中成功高效表达。
拟南芥、成纤维细胞生长因子-21、油体表达、磷酸甘露糖异构酶
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Q782(基因工程（遗传工程）)
国家"863"高技术研究发展计划项目生物反应器重大专项项目2007AAl00503;吉林省科技发展计划重点项目20070922;教育部高等学校科技创新工程重大项目70S018
2012-04-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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