农杆菌介导的成纤维细胞生长因子-21基因转化甘蓝型油菜研究
[目的]利用基因工程技术获得FGF21转基因油菜植株,为FGF21蛋白生产体系的建立莫定基础.[方法]将人源FGF21基因的cDNA序列,根据植物偏好密码子进行改造,并通过PCR拼接技术扩增FGF21全长基因,将该基因插入油菜油体特异表达载体,通过冻融法转到根瘤农杆菌LBA4404,叶盘法转化甘蓝型油菜"沪油15",并对转基因油菜进行PCR检测和Southern blot分析,最后对FGF21蛋白在转基因油菜种子中的表达的进行了Western blot分析.[结果]合成了FGF21全长基因,成功构建了含FGF21基因的植物双元表达载体p1390yoFGF21,并建立了油菜遗传转化体系.通过油菜遗传转化获得2株转基因植株,PCR扩增和Southern blot检测证实,重组FGF21基因已整合到油菜基因组中;Western blot分析检测显示,FGF21在转基因油菜种子蛋白中具有一定水平的表达量,并具有良好的抗原性.[结论]FGF21基因被成功整合到油菜基因组中,收获的T0代种子蛋白具有良好的抗原性.
成纤维细胞生长因子-21、甘蓝型油菜、生物反应器、转基因、农杆菌
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Q782;S565.4(基因工程(遗传工程))
国家"863"高新技术研究与发展计划项目生物反应器重大专项2007AA100503;吉林省科技发展重点计划项目20070922;教育部高等学校科技创新工程重大项目70S018;长春市科技计划项目06GG150
2016-05-06(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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